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特殊检测服务 >>> FISH检测服务
 

技术名称
荧光标记的原位杂交技术FISH技术平台(详情请见病理检测服务分子病理学部分介绍)

技术原理
FISH (fluorescence in situ hybridization)技术是一种重要的非放射性原位杂交技术。它的基本原理是:如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的,二者经变性-退火-复性,即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛,可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应,经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。

技术特点
原位杂交的探针按标记分子类型分为放射性标记和非放射性标记。用同位素标记的放射性探针优势在于对制备样品的要求不高,可以通过延长曝光时间加强信号强度,故较灵敏。缺点是探针不稳定、自显影时间长、放射线的散射使得空间分辨率不高、及同位素操作较繁琐等。采用荧光标记系统则可克服这些不足,这就是FISH技术。FISH技术作为非放射性检测体系,具有以下优点:(1)荧光试剂和探针经济、安全;(2)探针稳定,一次标记后可在两年内使用;(3)实验周期短、能迅速得到结果、特异性好、定位准确;(4)FISH可定位长度在1kb的DNA序列,其灵敏度与放射性探针相当;(5)多色FISH通过在同一个核中显示不同的颜色可同时检测多种序列;(6)既可以在玻片上显示中期染色体数量或结构的变化,也可以在悬液中显示间期染色体DNA的结构。

服务内容
FISH技术不但可用于已知基因或序列的染色体定位,而且也可用于未克隆基因或遗传标记及染色体畸变的研究。在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。
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